常見問題

微生物的菌種鑒定可以鑒定到“株”一級嗎？

如果你的菌株是自然界中分離得到，就只能鑒定到種，不能鑒定到株，因為多多少少和其他株系的細菌有區別，即便你做了一些特征的鑒定，發現和某一株細菌一模一樣，你也沒有理由說你的細菌就是那一株細菌，因為你不可能把所有的特征都做完，株和株之間的關系就相......

菌種鑒定的方法和步驟是什么？

菌種鑒定一般就只要提取基因組DNA，然后PCR擴增16srDNA片段，上GeneBank或者Eztaxon對比即可。一般序列相似度在97%以上就可以認為是同種細菌

菌種鑒定可以鑒定到種嗎？

利用rRNA的保守區域進行鑒定只是菌種鑒定的一個分子生物學指標，通過鑒定結果可以了解未知菌株和NCBI公布序列的哪個種屬比較接近。如果鑒定至種，還需要DNA雜交、基因組GC含量、生理生化指標等來綜合判斷。

峰圖中斷怎么處理

如下圖，測序峰圖到300多bp就中斷了。原因：變性后的單鏈在該處很有可能互補或在全序列中有大的特殊結構，造成嚴重的二級結構，使dNTP和ddNTP不能和模板結合，測序酶無法正常延伸。解決方法：酶切，做亞克隆測序　

測序結果出來雙峰如何處理

測序過程中最常見的問題是雙峰，導致整個結果不可用。明明挑的是單克隆，為什么還會碰到雙峰呢？其實導致雙峰的原因是多種的，雙克隆只是其中的一原因，而且不同的起因在峰圖上表現出不同的特征，通過對峰圖的分析找出雙峰的起因是解決問題最直接的方法。雙克......

堿基缺失導致峰圖混亂

堿基缺失其實是雙模板的一種特殊形態，指某一樣品在某一堿基后包含兩類片段，其中一條片段比另一條片段少（或多）幾bp或幾十bp，因此在峰圖上表現為從某處開始為兩個峰的疊加，堿基缺失多發生在PCR測序中，并在峰圖上表現出一定的規律。一個模板比另一......

poly結構導致移碼

PolyA/T結構通常致其后的峰圖出現重疊峰，PolyG/C 結構通常致其后的峰圖出現信號衰減。Poly結構是導致測序失敗最常見的原因之一，目前還沒有非常有效的方法徹底解決Poly結構的影響，但一般而言，PCR樣品Poly結構后雙峰的概率非......