如下圖,測序峰圖到300多bp就中斷了。
原因:變性后的單鏈在該處很有可能互補或在全序列中有大的特殊結構,造成嚴重的二級結構,使dNTP和ddNTP不能和模板結合,測序酶無法正常延伸。解決方法:
酶切,做亞克隆測序